БИОХИМИЯ, 1991, том 56, вып. 3, с. 508–520
Выделение и характеристика изоформ внеклеточной нуклеазы Serratia marcescens
Поступила в редакцию 25.06.1990
Аннотация
Из коммерческого препарата внеклеточной эндонуклеазы Serratia marcescens штамма B10 Ml выделены две формы фермента (нуклеазы Sm1 и Sm2), различающиеся по хроматографическим и электрофоретическим свойствам, изоэлектрическнм точкам и N-концевым аминокислотным остаткам. Выход нуклеаз Sm1, и Sm2 при двустадийной процедуре очистки с использованием ионообменной хроматографии на фосфо- и ДЭАЭ-целлюлозах составлял 13 и 26% соответственно. Нуклеазы близки по удельной активности, равной для нуклеаз Sm1 и Sm2 3,6·10^6 и 4,0·10^6 ед. акт. на 1 мг белка. Проведен сравнительный анализ пептидов триптических гидролизатов нуклеаз и определены аминокислотные последовательности отдельных участков полипептидных цепей белков. Показано высокое сходство структур и выявлено локальное отличие аминокислотных последовательностей в N-концевых сегментах ферментов. Прослежено расположение дисульфидных связей в молекулах нуклеаз. Сделан вывод о сходстве изоформ нуклеаз Sm1 и Sm2 штамма B10 M1 с эндонуклеазами Serratia marcescens, выделенными из других штаммов бактерий.