БИОХИМИЯ, 1991, том 56, вып. 1, с. 125–135
Выделение и свойства сериновой протеиназы Аspergillus oryzae
Поступила в редакцию 16.04.1990
Аннотация
Из амилоризина П-10х — смеси ферментов Aspergillus оrуzае, хроматографией на ДЭАЭ-сефадексе А-50 и бацитрацин-сефарозе 4В выделена сериновая протеиназа с оптимумом действия при pH 6,7—8,2. Протеиназа полностью инактивируется специфическими ингибиторами сериновых протеиназ — фенилметилсульфонилфторидом и диизопропилфторфосфатом, имеет изоэлектрическую точку при pH 7,5. Молекулярная масса протеиназы 30 000 Да, аминокислотный состав: Met2, Asp33, Thr18, Ser29, Glu21, Pro9, G1у32, Ala38, Val24, Не16, Leu15, Tyr8, Phe8, His8, Lys18, Arg4, Trp6. Определена N-концевая последовательность сериновой протеиназы Gly-Leu-Thr-Thr-Gln-Lys-Ser-Ala-Pro-Trp-Gly-Leu-Gly-Ser-He-Ser-Xaa-Lys-Gly-Gln-Gln-Ser-Thr-Asp-Tyr-He-Tyr, которая практически полностью совпадает с аналогичной последовательностью щелочной протеиназы А. оryzае АТСС20386 [1]. Подобно субтилизину фермент катализирует конденсацию n-нитроанилидов лейцина и аланина с метиловыми эфирами N-бензилоксикарбонил-аланилаланина и -глицил-аланина.