БИОХИМИЯ, 1991, том 56, вып. 1, с. 71–77
Выделение регуляторного GTP-связывающего Gs-белка, освобождающегося из мембран эритроцитов человека под действием фторид-иона
Поступила в редакцию 09.02.1990
Аннотация
Известно, что фторид-ион в присутствии ионов алюминия и магния вызывает активацию G-белков. После инкубации мембран эритроцитов человека с фторидом натрия в активирующих условиях и последующего центрифугирования 30 мин при 30 000 g супернатант обладает способностью стимулировать каталитический компонент аденилатциклазы. Проведено выделение стимулирующего фактора, включающее получение супер-натанта после обработки мембран фторидом натрия, ионообменную хроматографию на ДЭАЭ-сефацеле в отсутствие детергента, гель-фильтрацию на ультрагеле АсА 44 в присутствии 1% холата натрия и гидрофобную хроматографию на фенил-сефарозе CL-4B. В результате этих операций достигается очистка фактора в 120 раз по сравнению с исходным супернатантом, и полученный препарат содержит два полипептида с молекулярными массами 42 и 36 кДа. Комплекс βγ-субъединиц GTP-связывающего белка мембран мозга быка, G0, ингибирует стимулирующую активность очищенного препарата на 60%. Полученные результаты свидетельствуют о фторидзависимой диссоциации из мембран эритроцитов человека GTP-связывающего белка, стимулирующего аденилатциклазу, Gs.