БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 12, с. 2268–2273
УДК 577.152.3
Выделение, очистка и свойства целлобиогидролазы из Trichoderma longibrachiatum
Химический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 22.03.1990
После доработки 08.05.1990
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: целлобиогидролаза, ионообменная хроматография, изоэлектрофокусирование, электрофорез в полиакриламидном геле, углеводы, константа распределения, глюкан, целлюлоза.
Аннотация
Предложена схема выделения и очистки целлобиогидролазы из Trichoderma longibrachiatum, основанная на предварительной групповой очистке путем осаждения сульфатом аммония и ионообменной хроматографии на ДЭАЭ-сфероне с последующей двухкратной ионообменной хроматографией на колонке Mono Q. Данный метод позволил получить гомогенный по данным аналитического изоэлектрофокусирования и электрофореза в градиентном полиакриламидном геле фермент. Целлобиогидролаза имеет молекулярную массу 65000 Да по данным электрофореза, 54000 Да — по данным высокоэффективной гель-фильтрации, изоэлектрическую точку 3,7 и содержит в своем составе 1,6% углеводов. Константа распределения фермента на гидроцеллюлозе составляет 0,4 л/г. Определены активности целлобиогидролазы по отношению к карбоксиметилцеллюлозе, (β-глюкану, аморфной целлюлозе, микрокристаллической целлюлозе и метилумбеллиферил-β-D-целлобиозиду.