БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 11, с. 2011–2018
УДК 577.152.1
Каталитические свойства NADP-изоцитратдегидрогеназы листьев гороха в реакции восстановительного карбоксилирования
Воронежский госуниверситет имени Ленинского комсомола
Поступила в редакцию 16.01.1990
После доработки 20.03.1990
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: NADP, изоцитратдегидрогеназа, восстановительное карбоксилирование, 2-оксоглутарат, каталитические свойства, ионогенные группы.
Аннотация
На гомогенном препарате NADP-специфичной изоцитратдегидрогеназы (КФ 1.1.1.42) из листьев гороха проведены исследования ее каталитических свойств в реакции восстановительного карбоксилирования 2-оксоглутарата. Показано, что температурный оптимум реакции — 18°, энергия активации Eакт равна 26,5 кДж/моль; pH-оптимум — 6,0. Сукцинат, изоцитрат, цитрат, цис- и транс-аконитат являются конкурентными ингибиторами NADP-изоцитратдегидрогеназы по отношению к 2-оксоглутарату, NADP+ —конкурентный ингибитор фермента по отношению к NADPH; ATP, ADP, GDP тормозят ферментативную реакцию. Ингибирующий эффект ATP снижается с увеличением концентрации ионов Mn2+, являющихся активаторами NADP-изоцитратдегидрогеназы. Исследование влияния диэтилпирокарбоната, величины pH на Km NADP-изоцитратдегидрогеназы, определение pK. функциональных групп позволяют предполагать участие в катализе карбоксильной группы аспарагиновой или глутаминовой кислот и имидазольной группы гистидина. Свойства фермента сравниваются с таковыми в реакции окислительного декарбоксилирования изоцитрата.