БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 10, с. 1795–1811
УДК 577.162.1
Кинетическая схема действия 5-липоксигеназы нейтрофилов человека
Межфакультетская ПНИЛ им. А.Н. Белозерского МГУ
Поступила в редакцию 25.09.1989
После доработки 19.04.1990
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: 5-липоксигеназа, нейтрофил, лейкотриен B4, арахидоновая кислота, Ca2+-ионофор A23187.
Аннотация
Арахидоновая кислота в животных клетках трансформируется по 5-, 12-, и 15-липоксигеназному пути. В литературе опубликован кинетический механизм действия 15-липоксигеназы, как растительной (соевой), так и животной (ретикулоцитов). Наиболее сложным механизмом регуляции активности обладает, по-видимому, 5-липоксигеназа. К настоящему времени обнаружен ряд эффекторов 5-липоксигеназы нейтрофилов как цитозольной, так и мембранной природы. Молекулярный и кинетический механизм действия фермента окончательно не выяснен. В данной работе предложена кинетическая схема регуляции синтеза 5-липоксигеназных метаболитов арахидоновой кислоты в нейтрофилах. Предложенная кинетическая схема действия 5-липоксигеназы не исключает наличия двух центров связывания на ферменте. Активной формой фермента в кинетической схеме может быть комплекс молекулы фермента с активатором. Экспериментально установлено, что кинетика накопления 5-HETE при стимуляции нейтрофилов кальциевым ионофором A23187 во времени имеет вид кривой с максимумомTBа nbsp;кинетика накопления LTB4 — вид кривой с насыщением. Показано, что с ростом концентрации экзогенного арахидоната стимулируется синтез 5-HETE и практически не возрастает количество LTB4. На основании математического анализа предложенной кинетической схемы и сравнения расчетных и экспериментальных данных показано, что эффектор реакции, Ca2+, играет основную регуляторную роль в формировании наблюдаемых кинетических зависимостей образования двух последовательных продуктов 5-липоксигеназного окисления арахидоната, решающим образом влияя на первую стадию реакции, стадию образования 5-HPETE, и в значительной меньшей степени на вторую — стадию трансформации 5-HPETE в LTA4.