БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 9, с. 1690–1699
УДК 547.963
Влияние щелочных легких цепей миозина на взаимодействие субфрагмента 1 миозина с актином в растворе и в теневом мышечном волокне
Институт биохимии им. A.H. Баха АН СССР, Москва
Институт цитологии АН СССР, Ленинград
Лаборатория молекулярной биологии и биоорганической химии им. А.Н. Белозерского Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 27.11.1989
После доработки 02.12.1989
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: миозин, щелочные легкие цепи, субфрагмент 1, изоформы, взаимодействие с Ф-актином.
Аннотация
При низкой ионной силе (7—25 мМ) Mg2+-ATPаза изоформ субфрагмента 1 миозина (S1), содержащих щелочную легкую цепь A1 (S1(A1)), активируется актином в 1,5—2,5 раза сильнее, чем Mg2+-ATPаза изоформ S1, содержащих щелочную легкую цепь A2 (S1(A2)). Методом аналитического ультрацентрифугирования показано, что при низкой ионной силе в отсутствие ATP в растворе S1(A1) обладает более высоким сродством к Ф-актину, чем S1(A2). Об этом свидетельствуют также данные экспериментов по взаимодействию изоформ S1, предварительно модифицированных флуоресцентной меткой 1,5-IAEDANS, с Ф-актином теневых мышечных волокон. Методом поляризационной микрофлуориметрии показано, что обе изоформы S1, связываясь с Ф-актином теневых волокон, вызывают сходные изменения поляризованной триптофановой флуоресценции, однако по-разному влияют на подвижность флуоресцентной метки, предварительно присоединенной к SH-гpyппe Cys-374 в C-концевой области молекул актина: S1(A1) значительно подавляет подвижность метки, a S1(A2) — лишь слегка снижает ее. Таким образом, изоформы S1, связываясь с Ф-актином, по-разному взаимодействуют с C-концевыми областями молекул актина: у S1(A1) связывание более прочное. Это можно объяснить тем, что щелочная легкая цепь A1 в отличие от A2 имеет контакт с C-концевой областью актина.