БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 9, с. 1668–1674
УДК 577
Очистка и свойства метиламиндегидрогеназы облигатного метилотрофа Methylobacillus flagellatum KT
ВНИИ генетики и селекции промышленных микроорганизмов, Москва
Поступила в редакцию 22.11.1989
После доработки 07.02.1990
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: метиламиндегидрогеназа, облигатные метилотрофы, Methylobacillus flagellatum KT.
Аннотация
Из клеток облигатного метилотрофа Methylobacillus flagellatum KT выделены дегидрогеназы метиламина. Метод выделения включал тепловую обработку, осаждение сульфатом аммония, хроматографию через сефадекс G-75 и ионообменную хроматографию на DEAE-Toyopearl. После ионообменной хроматографии исследуемый фермент разделился на две фракции. Фермент из фракции 1 (МАДГ1) не является гомогенным по данным электрофореза, имеет массу 55 кДа, изоточку 8,8. Метиламиндегидрогеназа из фракции 2 (МАДГ2) по данным электрофореза в полиакриламидном геле и гель-фильтрации является гомогенной, имеет массу 60 кДа, однако при изофокусировании дает две полосы с изоточками 7,8 и 7,4. Оба фермента (МАДГ1 и МАДГ2) состоят, по-видимому, из двух субъединиц (α β) с массами 43 и 16 кДа. Значения констант Михаэлиса для МАДГ1 составляют 20 мкМ для метиламина и 210 мкМ для ФМС. Km для МАДГ2 составляют 14 и 145 мкМ соответственно. Ферменты из обеих фракций обладают высокой термостабильностью и имеют pH-оптимум в области 7,5.