БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 9, с. 1638–1647
УДК 577.152.3
Аллостерическая природа субстратного ингибирования фруктозо-1,6-бисфосфатазы из скелетных мышц кролика
Институт биологической и медицинской химии АМН СССР, Москва
Поступила в редакцию 24.09.1989
После доработки 26.12.1989
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: фруктозо-16-бисфосфатаза, субстратное ингибирование, аллостерический ингибитор.
Аннотация
Исследовали механизм субстратного ингибирования фруктозо-1,6-бисфосфатазы из скелетных мышц кролика. Анализ кривых зависимости начальной скорости реакции от концентрации субстрата, полученных при разных концентрациях Mg2+, показал, что субстрат ингибирует, образуя комплекс с Mg2+, в то время как свободная форма субстрата не является ингибитором. Получено доказательство аллостерической природы субстратного ингибирования путем частичной десенсибилизации фермента в присутствии салицилатов. Установлено, что ингибирование субстратом фруктозо-1,6-бисфосфатазы носит кооперативный характер и происходит неконкурентно по отношению к субстрату, подвергающемуся каталитическому превращению. Эксперименты по модификации фермента DTNB и пиридоксаль-5′-фосфатом показали, что ингибирующие концентрации субстрата связываются в центре, отличном от аллостерического центра для AMP. Предполагается, что антагонизм, наблюдаемый при совместном действии AMP и субстрата в высоких концентрациях, может быть следствием конкуренции при связывании фосфатных групп этих лигандов с общим остатком лизина, локализованным в области перекрывания двух аллостерических центров.