БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 9, с. 1570–1577
УДК 577.152.6
Сравнительное исследование фенилаланил-тРНК-синтетаз из Escherichia coli и Thermus thermophilus методом тритиевой планиграфии
Институт биоорганической химии СО АН СССР, Новосибирск
ИХФ АН СССР, Москва
Межфакультетская проблемная НИЛ им. А.Н. Белозерского МГУ, Москва
Поступила в редакцию 29.06.1989
После доработки 12.11.1989
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: фенилаланил-тРНК-синтетаза (E. coli, Thermus thermophilus), сравнительное изучение, тритиевая планиграфия.
Аннотация
Проведено сравнительное изучение термостабильности и аминокислотного состава фенилаланил-тРНК-синтетаз из E. coli и Thermus thermophilus HB8. Область оптимальных для ферментативной активности температур составляет 40—45° для мезофильного фермента и 75—80° для термофильного. Выявлено значительное увеличение содержания Pro, Leu, Phe, Arg и уменьшение содержания Asx, He, Ser, Thr, Lys в термофильном белке при сравнении с мезофильным. Методом тритиевой планиграфии определены относительные распределения площадей доступных поверхностей аминокислотных остатков сравниваемых фенилалаиил-тРНК-синтетаз. Качественный состав доступных поверхностей обоих белков характеризуется наибольшей доступностью Pro; (Leu+Ile); Gly. В случае фермента из E. coli более доступными являются также остатки Thr, в то время как на поверхности термофильного белка больше остатков Arg. Найдено, что суммарное содержание гидрофобных остатков составляет 46 и 53% в мезофильном и термофильном белках соответственно, причем распределение гидрофобных остатков между внутренней частью глобулы и поверхностью для этих ферментов примерно одинаково. При сравнении количественного состава поверхностей наблюдается увеличение экспонированности на поверхности термофильного фермента остатков Leu+Ilе, а также заряженных остатков Asx и Arg. Обсуждается возможная связь наблюдаемых эффектов с термостабильностью.