БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 8, с. 1461–1467
УДК 577.216.35
Стабильные плотные нуклеотид-связывающие частицы в ооцитах амфибий, коседиментирующие со свободными цитоплазматическими информосомами
Институт биохимии им. A.H. Баха АН СССР
Поступила в редакцию 25.08.1989
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: экстракт ооцитов, нуклеотид-связывающие частицы, цитоплазматические информосомы.
Аннотация
При фракционировании безмитохондриального экстракта ооцитов амфибий в градиенте концентрации сахарозы было замечено, что в зоне информосом (50—70 S) седиментируют некие частицы, обладающие способностью связывать GTP и ATP с Kd = 30 мкМ по отношению к ATP. При работе с нуклеотидами, меченными радиоактивным фосфатом по γ-положению, обнаруженный эффект создает иллюзию фосфорилирования белков информосом. При этом нуклеотид-связывающие частицы отличаются от информосом по плавучей плотности (1,8 г/см3 в градиенте CsCl и 1,45 г/см3 в градиенте CS2SO4). Получены доказательства того, что изучаемая реакция представляет собой именно нековалентное связывание нуклеотидов. Обработка экстракта ооцитов РНКазой, ДНКазой, протеиназой K, α-амилазой, комплексом гидролаз из Helix pomatia, тритоном X-100, ЭДТА не изменяет ни коэффициента седиментации, ни ATP-связывающей активности изучаемых частиц. Обсуждается возможная природа и функции выявленных структур