БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 7, с. 1182–1191
УДК 577.152.1
О роли гидроксильных групп тирозиновых остатков РНК-лигазы
Кафедра биохимии и биофизики Вильнюсского государственного университета
Кафедра биохимии Дебреценского университета им. Л. Кошута, Венгрия
Поступила в редакцию 22.02.1989
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: РНК-лигаза, тирозиновые остатки, модификация, ATP.
Аннотация
Исследована стабильность AMP—РНК-лигазного комплекса при хранении. Комплекс стабилен не менее двух недель (0°) и сохраняет ~50% исходной радиоактивности в течение 49 суток (9°). Обнаружение аденозина среди продуктов расщепления комплекса позволяет предполагать возможность участия гидроксильных групп тирозиновых остатков фермента в образовании AMP—РНК-лигазного комплекса. Проведена модификация гидроксильных групп тирозиновых остатков фермента N-ацетилимидазолом. Показано, что 4 из 25 тирозиновых остатков в молекуле фермента взаимодействуют с модифицирующим агентом исключительно легко, вследствие чего фермент полностью теряет способность образовывать AMP—РНК-лигазный комплекс. Определены и сравнены кинетические параметры (Km и V) нативного и модифицированного ферментов. Предложена гипотетическая схема участия гидроксильной группы тирозинового остатка РНК-лигазы в ферментном катализе.