БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 6, с. 1073–1080
УДК 577.1
pH-зависимость гормонсвязывающей и ферментативной активностей эстрофильной оксистероиддегидрогеназы печени кролика
Лаборатория эндокринологии биологического факультета Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 28.03.1989
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: оксистероиддегидрогеназа, pH-зависимость, связывание стероидных гормонов, печень.
Аннотация
Исследовали влияние pH на способность NADP-зависимой эстрофильной оксистероиддегидрогеназы из растворимой фракции печени кролика связывать стероиды и катализировать их 3α-, 3β-, 17β- и 20α-окислеиие и восстановление. Установлено, что оптимум pH для катализа превращений разных стероидов может значительно различаться, достигая более 2 единиц pH. Эти различия не связаны с локализацией метаболизируемой группы в молекуле стероида. Анализ ферментативной кинетики свидетельствует о влиянии pH на эффективность катализа, сродство стероида к белку и степень взаимовлияния стероида и кофактора при их связывании с белком. Результаты прямого определения связывания 3H-стероидов с оксистероиддегидрогеназой подтверждают эти предположения. Показано также, что максимальный уровень связывания разных стероидов белком может достигаться при значениях pH, различающихся более чем на 4 единицы. Скэтчардовский анализ связывания выявил влияние концентрации водородных ионов как на сродство стероида к белку, так и на концентрацию стероидсвязывающих участков оксистероиддегидрогеназы. Полученные результаты рассматриваются как доказательство «избыточности» стероидсвязывающего участка белка, которая обеспечивает полифункциональность эстрофильной оксистероиддегидрогеназы, включая возможность альтернативной посадки стероида в связывающем центре.