БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 6, с. 1018–1024
УДК 577.152.3
Изучение субстратной специфичности ацетил-CoA-карбоксилазы печени крысы
Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта АН СССР, Москва
НПО «Витамины», Москва
Поступила в редакцию 13 03.1989
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ацетил-CoA, CoA, предшественники, ацетил-CoA-карбоксилаза, субстратная специфичность.
Аннотация
Исследовано взаимодействие фрагментов ацетил-CoA с ацетил-CoA-карбоксилазой печени крысы. 3′-Фосфатная группа не оказывает влияния на взаимодействие с ферментом, поскольку субстратные свойства ацетил-дефосфо-CoA и ацетил-CoA практически не различаются. Ненуклеотидные аналоги субстрата S-ацетилпантетеин и его 4′-фосфат также обладают субстратными свойствами (V = 1,5 и 15% от V карбоксилирования ацетил-CoA соответственно). Нуклеотидный фрагмент в молекуле ацетил-CoA оказывает выраженное влияние на термодинамику взаимодействия данного субстрата с ферментом. Его роль, вероятно, заключается в активации и необходимой ориентации ацетильной группы в активном центре. Существенно более выраженные субстратные свойства 4′-фосфата S-ацетилпантетеина и ингибиторные свойства 4′-фосфата пантетеина по сравнению с нефосфорилированными аналогами указывают на важную роль β-фосфатного остатка ADP в связывании ацетил-CoA с ферментом. Полученные данные свидетельствуют также о том, что к гидрофобной области, связывающей ацильные радикалы, прилежит участок, специфически узнающий β-меркаптоэтильный остаток пантетеинового фрагмента CoA. Определяющим во взаимодействии ацетил-CoA-карбоксилазы с субстратом является продуктивное связывание ацетильного радикала, в то время как отдельные фрагменты молекулы CoA в различной степени способствуют данному процессу.