БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 5, с. 888–897
УДК 577.152.3
Исследование роли остатков гистидина в молекуле стрептокиназы с помощью модификации диэтил пирокарбонатом
Белорусский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии Минздрава БССР, Минск
Поступила в редакцию 14.02.1989
После доработки 12.07.1989
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: стрептокиназа, остатки гистидина, инактивация, структура белка.
Аннотация
Изучено взаимодействие стрептокиназы с диэтилпирокарбонатом. Установлено, что при pH 6,0 диэтилпирокарбонат реагирует с восемью остатками гистидина на молекулу белка, что сопровождается существенным снижением функциональной активности последнего. Процесс модификации гистидилов стрептокиназы характеризуется константой скорости псевдопервого порядка, равной 0,1 мин−1 и близкой к таковой для процесса этоксиформилирования свободного L-гистидина, и частичной утратой активаторной функции белка. Два остатка гистидина этоксиформилируются необратимо, обработка модифицированной стрептокиназы гидроксиламином не приводит к ее реактивации. Судя по характеру спектров кругового дихроизма, модифицируемые диэтилпирокарбонатом остатки не вносят существенного вклада в стабилизацию вторичной структуры белка. Обсуждаются вопросы специфичности модификации гистидилов диэтилпирокарбонатом. На основании данных гельхроматографии предполагается, что частичная инактивация стрептокиназы обусловлена образованием олигомеров белка с пониженной активаторной функцией.