БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 5, с. 829–835
УДК 577.123
Исследование нуклеозидтрифосфатсвязывающего центра ДНК-зависимой РНК-полимеразы фага T7 с помощью аналогов GTP
Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта АН СССР, Москва
Проблемная лаборатория химии ферментов, биологический факультет Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 23.01.1989
После доработки 27.03.1989
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: T7 РНК-полимераза, NTP-связывающий центр, ингибирование.
Аннотация
Нуклеозидтрифосфатсвязывающий центр ДНК-зависимой РНК-полимеразы бактериофага Т7 был исследован с помощью ряда аналогов GTP. Показан необратимый характер ингибирования фермента четырьмя соединениями. Установлены кинетические параметры конкурентного (Ki) и необратимого (Ki, k3) ингибирования для этих соединений. Один из аналогов, 5′-[2-гидрокси(4-иодацетамидо) бензил] гуанозин, быстро инактивирует фермент вследствие модификации сульфгидрильных групп. Полученные данные позволяют сделать некоторые предположения относительно важности тех или иных фрагментов молекулы субстрата для связывания последнего активным центром фермента.