БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 3, с. 471–479
УДК 577.1
Кинетическая кооперативность при ингибировании активности протеинкиназы с диеновыми конъюгатами из фосфолипидов и арахидоновой кислоты in vitro
Институт химической физики АН СССР, Москва
Поступила в редакцию 14.10.1988
После доработки 03.01.1989
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: протеинкиназа C, кинетическая кооперативность, ингибирование, диеновые конъюгаты.
Аннотация
Изучено изменение активности протеинкиназы C, выделенной из сердец кроликов, при добавлении фосфолипидов (фосфатидилсерина, фосфатидилэтаноламина, фосфатидилинозита) и арахидоновой кислоты различной степени окисленности. Показано, что диеновые конъюгаты, являющиеся показателем степени окисленности эффекторов, действуют как ингибиторы данного фермента. Обнаружена кинетическая кооперативность (положительная) ферментативной реакции по ингибиторам—диеновым конъюгатам: коэффициент Хилла для фосфолипидов 1,75, для арахидоновой кислоты > 4. Установлено, что уравнение Хилла для ингибиторов выполняется в случае фосфолипидов и не соблюдается в случае арахидоновой кислоты. На примере арахидоновой кислоты показано, что повышение кооперативности (увеличение коэффициента Хилла) происходит при изменении степени окисленности в очень узком интервале (15—22%). Обнаружено, что сродство фермента к диеновым конъюгатам фосфолипидов различно: у фосфатидилэтаноламина и фосфатидилинозита оно в ~2 раза выше, чем у фосфатидилсерина, что соответственно в 5—10 раз больше, чем для диеновых конъюгатов арахидоновой кислоты. Делается вывод, что протеинкиназа C относится к пероксилипидзависимым ферментам, высокочувствительным к продуктам перекисного окисления липидов.