БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 2, с. 352–360
УДК 577.152.042
Изучение pH-зависимости кинетических параметров функционирования пируваткиназы из коры надпочечников быка
Лаборатория биохимии эндокринных желез Института биохимии АН БССР, Гродно
Поступила в редакцию 16.08.1988
После доработки 19.12.1988
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: пируваткиназа, кора надпочечников, кинетические параметры, параметры спектров флуоресценции.
Аннотация
Изучено влияние pH на основные кинетические параметры функционирования пируваткиназы. Максимальная скорость реакции, константа Михаэлиса для ADP и константа ингибирования фенилаланином зависят от pH и имеют четко выраженный максимум при pH 6,8—7,0. Спектрофлуориметрическим титрованием пируваткиназы получены pH-зависимости изменения параметров спектров флуоресценции (квантового выхода, полуширины и положения максимума), по которым установлены области pH, соответствующие изменению состояния остатков триптофанов. На основании анализа данных по ингибированию фермента фенилаланином сделан вывод, что при подкислении среды снижение каталитической активности происходит за счет протежирования ионогенной группы фермента. В интервале значений pH 7,0—8,0 снижение активности пируваткиназы обусловлено структурными сдвигами в молекуле белка, следствием которых является нарушение стерической комплементарности активного центра по отношению к субстрату Mg-ADP.