БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 1, с. 155–164
УДК 577.152.1
Исследование структурной организации олигомеров цитохрома P-450 с использованием иммобилизованной изоформы LM 2
Институт химической физики AH СССР, Москва
Лаборатория молекулярной биологии и биоорганической химии им. А.Н. Белозерского МГУ
Поступила в редакцию 22.08.1988
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: цитохром P-450, LM2, иммобилизация, структурная организация.
Аннотация
Исследовали характер межсубъединичных контактов в гексамерных ассоциатах высокоочищенного цитохрома Р-450 LM 2 из эндоплазматического ретикулума клеток печени кроликов. Для этой цели использовали цитохром Р-450 LM 2, иммобилизованный на нерастворимом носителе посредством ковалентного присоединения к последнему только одного из шести протомеров гексамерной структуры. Иммобилизованный цитохром был каталитически активен в монооксигеназных реакциях и сохранял спектральные характеристики цитохрома Р-450 LM 2. Продемонстрирована преимущественная роль гидрофобных взаимодействий в межсубъединичиых контактах гексамеров цитохрома Р-450 LM 2. Агрегатное состояние иммобилизованного гемопротеина не изменялось при высокой ионной силе, в широком интервале pH среды, в растворах гуанидинхлорида, однако гексамеры диссоциировали в разной степени в присутствии некоторых детергентов. Тем не менее при инкубации иммобилизованного цитохрома Р-450 LM 2 с ультразвуковыми липосомами различного фосфолипидного состава не наблюдалось диссоциации его олигомеров и перераспределения белка с матрицы в липидную фазу, несмотря на значительное увеличение каталитической активности иммобилизованного цитохрома в присутствии липосом в тех же условиях. Данные предполагают возможность существования четвертичной структуры цитохрома Р-450 LM 2 в нативных мембранах.