БИОХИМИЯ, 1990, том 55, вып. 1, с. 65–72
УДК 577.152.3
Гликогенфосфорилаза из лейкоцитов человека. Выделение и кинетические свойства
Кафедра химической энзимологии Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
ВКНЦ АМН СССР им. А.Л. Мясникова, Москва
Поступила в редакцию 17.07.1988
После доработки 14.10.1988
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: гликогенфосфорилаза, лейкоциты человека, биолюминесценция, кинетические свойства, соиммобилизованные ферменты.
Аннотация
Получена гомогенная гликогенфосфорилаза из лейкоцитов человека. Разработан одностадийный биолюминесцентный метод определения активности фермента, основанный на непрерывной регистрации продукта реакции, катализируемой гликогенфосфорилазой, с использованием соиммобилизованной полиферментной системы: фосфоглюкомутаза, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа, NADH : FMN-оксидоредуктаза и бактериальная люцифераза. Чувствительность его в 10 раз выше по сравнению с описанными ранее методами. Определены Km по гликогену (0,2 мг/мл) и фосфату (3,9 мМ) при pH 7,0 и показано, что AMP является эффектором данного фермента. Сравнены кинетические свойства гликогенфосфорилазы из лейкоцитов человека с гликогенфосфорилазами из других источников. Показано, что гликогенфосфорилаза лейкоцитов человека по свойствам близка к изоферменту из мышц.