БИОХИМИЯ, 1985, том 50, вып. 12, с. 1965–1971
УДК 547.857.7
Расположение ATP-связывающего участка Fe‑белка относительно железо-серных кластеров 4Fe‑4S и железо-молибденсодержащего кофактора
Отделение Института химической физики АН СССР, Черноголовка
Поступила в редакцию 8.02.1985
Аннотация
Нитрогеназу аффинно метили ε‑ATP по ATP-связывающим центрам, и разделяли на белковые компоненты ионообменной хроматографией. При спектрофлуориметрическом титровании меченого Fe‑белка нативным MoFe-белком из дикого штамма азотобактера и MoFe-белком, не содержащим железо-серные кластеры 4Fe‑4S, наблюдали 4—6-кратное тушение флуоресценции иммобилизованного ε‑ATP. При титровании меченого Fe‑белка MoFe-белком из мутанта азотобактера UW‑45, напротив, происходит 4‑кратное увеличение флуоресценции иммобилизованного ε‑ATP. Поскольку MoFe-белок мутанта азотобактера UW‑45 отличается от MoFe-белка из дикого штамма азотобактера лишь отсутствием железо-молибденсодержащего кофактора (FeMo-кофактор), предполагается, что ATP-связывающий участок Fe-белка при образовании комплекса с MoFe-белком располагается рядом с FeMo-кофактором и удален от железо-серых кластеров 4Fe‑4S. Образование комплекса сопровождается изменением конформации Fe‑белка.