БИОХИМИЯ, 1985, том 50, вып. 10, с. 1668–1675
УДК 577.152.1
Неэквивалентность активных центров α-кетоглутаратдегидрогеназы, выявляемая при модификации гистидиновых остатков
Кафедра биохимии и Лаборатория молекулярной биологии и биоорганической химии им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 04.02.1985
Аннотация
Методом избирательной химической модификации гистидиновых остатков α-кетоглутаратдегидрогеназного компонента α-кетоглутаратдегидрогеназного комплекса показано существование взаимопревращающихся форм фермента, которые отличаются по кинетике инактивации под действием диэтилпирокарбоната. В процессе взаимопревращения форм участвует α-кетоглутарат. При исследовании влияния субстрата на кинетику инактивации отдельных форм фермента выявлена неэквивалентность активных центров в составе димерной молекулы α-кетоглутаратдегидрогеназного компонента. В результате взаимодействия активных центров при связывании α-кетоглутарата на одной из субъединиц увеличивается доступность для модификатора функциональноважного остатка гистидина в активном центре соседнего, свободного от субстрата мономера. Неэквивалентность активных центров фермента проявляется также в разной скорости взаимодействия и в различной прочности связывания с ними α-кетоглутарата. Сделано предположение, что двухфазная кинетика инактивации препаратов α-кетоглутаратдегидрогеназы , выделяемых из грудной мышцы голубя, обусловлена прочным связыванием α-кетоглутарата или продуктов его каталитического превращения в одном из активных центров димерной молекулы фермента.