БИОХИМИЯ, 1985, том 50, вып. 9, с. 1453–1462
УДК 677.152.344.1:591:434
Протеиназы энтероцитов тонкого кишечника свиньи. Очистка и свойства аспартильной протеиназы, сходной с катепсином D
Московская ветеринарная академия им. К.И. Скрябина
Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина АН СССР, Москва
Поступила в редакцию 20.12.1984
Аннотация
Из слизистой тонкого кишечника свиньи выделена новая аспартильная протеиназа. Фермент очищен до гомогенного состояния с помощью аффинной хроматографии на пепстатин-сефарозе 4B и гель-хроматографии на сефадексе G-100. Степень очистки составляет 1600 раз. Фермент является гомогенным по электрофорезу в акриламидном геле. Он имеет множественные формы с pI 6,9, 7,5 и 8,0. Молекулярная масса, определенная гель-фильтрацией на сефадексе G-100, электрофорезом в полиакриламидном геле и титрованием пепстатином, составляет 60000 ± 4000 Да. При электрофорезе в полиакриламидном геле, содержащем DS-Na как в присутствии, так и в отсутствие меркаптоэтанола фермент мигрирует в виде одной полосы с Mr 30000 ± 3000. Определен аминокислотный состав протеиназы, ее специфичность в отношении B-цепи инсулина и синтетических субстратов, а также чувствительность к ингибиторам. Оптимум pH фермента по гидролизу гемоглобина 3,2. Фермент является гликопротеином, содержащим 5,9% углеводов: маннозу и галактозу в соотношении 4 : 3. Иммунологически идентичен с катепсином D из селезенки свиньи.