БИОХИМИЯ, 1985, том 50, вып. 9, с. 1433–1439
УДК 577.152.344
Модуляция модифицированными формами тромбина агрегационной способности тромбоцитов
Институт физиологически активных веществ АН СССР, Черноголовка Московской области
Кафедра физиологии животных и человека МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва
Центральный научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови, Москва
Поступила в редакцию 11.12.1984
Аннотация
Показано, что тромбоциты человека обладают высокой чувствительностью к α-тромбину (Km = 2 нМ). Модифицированные формы тромбина — β/γ-тромбин с нарушенным участком узнавания высокомолекулярных субстратов и диизопропилфосфат-α-тромбин (ДИФ-α-тромбин), а также трипсин не способны вызывать агрегацию тромбоцитов в концентрациях, соответствующих эффективным концентрациям α-тромбина. β/γ-Тромбин и трипсин, в отличие от ДИФ-α-тромбина, вызывают агрегацию тромбоцитов в концентрациях 100—200 нМ. При исследовании модулирующего влияния модифицированных форм тромбина, α-тромбина и трипсина на агрегацию тромбоцитов, вызванную α-тромбином, обнаружено, что β/γ-, α-тромбины и трипсин в концентрациях, не ведущих к агрегации клеток, вызывают потенцирование ответа при инкубации с тромбоцитами в течение 2 мин и торможение агрегации тромбоцитов при более длительной инкубации (15 мин). Однако ДИФ-α-тромбин при инкубации с тромбоцитами (до 30 мин) увеличивает чувствительность тромбоцитов к агрегации α-тромбином. Активирующее влияние ДИФ-α-тромбина характеризуется равновесной константой KA, равной 17 нМ. Полученные результаты подтверждают гипотезу о том, что для осуществления полноценной физиологической реакции тромбоцитов на α-тромбин необходимым условием является сохранение в молекулах тромбина интактного активного центра и участка узнавания высокомолекулярных субстратов. Специфичность тромбина как сильного индуктора агрегации тромбоцитов определяется участком узнавания высокомолекулярных субстратов.