БИОХИМИЯ, 1985, том 50, вып. 7, с. 1201–1212
УДК 577.123
Экспрессия рибосомных генов в семядолях гороха на начальных стадиях прорастания
Институт биохимии им. А.Н. Баха АН СССР, Москва
Поступила в редакцию 10.12.1984
Аннотация
Исследовано время появления новосинтезированных рРНК и рибосомных белков (р-белков) в рибосомах семядолей гороха (Pisum sativum L.) в процессе прорастания. Рибосомную фракцию выделяли и анализировали по мере прорастания зародыша в присутствии меченых предшественников либо после импульсного мечения зародышей на разных стадиях прорастания. Для идентификации новосинтезированных рРНК в рибосомах оценивали относительную устойчивость меченых РНК к действию РНКазы, скорость седиментации, способность метилироваться in vivo в присутствии [14C] CH3-метионина, локализацию в субъединицах диссоциированных рибосом. О наличии новосинтезированных р-белков в рибосомах судили на основании электрофоретического сходства при DS-Na-диск-электрофорезе меченых полипептидов очищенных препаратов рибосом и подлинных р-белков, а также по локализации меченых белков в субъединицах диссоциированных рибосом. Показано, что экспрессия, рибосомных генов в высокоспециализированных закончивших рост клетках семядолей гороха происходит на очень ранних стадиях прорастания. Уже в период набухания зародыша (первые 6—8 ч) в цитоплазме клеток семядолей можно обнаружить 80S-рибосомы, содержащие в своем составе новообразованные 25S- и 18S-pPHK и р-белки. По крайней мере. часть «новых» 80S-рибосом локализована в полисомах и наряду со «старыми» рибосомами участвует в синтезе белка. В период гидратации зародыша доля новосинтезированных рРНК в рибосомной фракции семядолей, по сравнению с мРНК, незначительна. К концу лаг-фазы скорость синтеза рРНК существенно возрастает, и это коррелирует с ускорением синтеза р-белков.