БИОХИМИЯ, 1985, том 50, вып. 6, с. 911–918
УДК 577.152.4
Фракционирование фрагментов саркоплазматического ретикулума скелетной мышцы по их чувствительности к кофеину
Институт зкепериментальной кардиологии Всесоюзного кардиологического научного центра АМН СССР, Москва
Поступила в редакцию 22.XI.1984
Аннотация
Проведено разделение фрагментов саркоплазматического ретикулума,
основанное на способности кофеина избирательно блокировать поглощение Ca2+ в популяции кофеинчувствительных мембран. Суспензию мембран ретикулума загружали кальцием в присутствии оксалата, Mg-ATP и кофеина, после чего поглотившие кальций кофеиннечувствительные фрагменты осаждали центрифугированием в градиенте плотности сахарозы. Во фракции незагруженных фрагментов надосадка чувствительность к кофеину, оцениваемая по его способности снижать скорость поглощения Ca2+, величину Ca/ATP и Ca-оксалатную емкость, достигала 91—93%. По белковому составу чувствительные к кофеину фрагменты были отождествлены с мембранами терминальных цистерн, а нечувствительные — с мембранами канальцев СР. Чувствительность к кофеину, может быть достаточно надежным критерием для оценки относительного содержания фрагментов терминальных цистерн в различных препаратах микросом.