БИОХИМИЯ, 1985, том 50, вып. 4, с. 595–603
УДК 577.112
Выделение, очистка и свойства РНК-полимеразы II, солюбилизирующейся из ядер Physarum polycephalum в низкой ионной силе
Лаборатория молекулярной биологии и биоорганической химии им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва
Поступила в редакцию 04.07.1984
Аннотация
Описаны выделение и очистка РНК-полимеразы II из ядер Physarum polycephalum. Солюбилизацию фермента проводили из ядер культуры, росшей 70—100 ч на питательной среде, обедненной Ca2+, посредством нуклеазной и ультразвуковой обработки ядер. Очистка включала хроматографию на ДЭАЭ-сефадексе A-25 градиентом концентрации сульфата аммония, фосфоцеллюлозе и повторную хроматографию на ДЭАЭ-сефадексе A-25. Выход фермента составил 20—26%, степень очистки — 550-800 раз. Изучены свойства фермента на разных стадиях очистки. Электрофоретически обнаружены две субъединицы с молекулярной массой более 200000 Да. Обращается внимание на появление в ходе очистки, возможно из-за протеолиза, фракции фермента с субъединицей 170000 Да.