БИОХИМИЯ, 1985, том 50, вып. 2, с. 337–346
УДК 577.353.2
Кинетика биосинтеза и распределение меченого актиноподобного белка в субмитохондриальных фракциях печени крысы
Минский государственный медицинский институт
Поступила в редакцию 05.07.1984
Аннотация
С помощью метода аффинной сорбции на иммобилизованной ДНКазе I и данных по измерению подвижности при электрофорезе в полиакриламидном геле с DS-Na была произведена идентификация актиноподобного белка и исследован процесс его биосинтеза в митохондриях печени гепатэктомированных крыс. Кинетика синтеза характеризовалась максимумом, выраженным на 10-й мин после внутрибрюшинного введения животным радиоактивной метки. Фракционирование митохондрий показало, что более половины всего количества вновь синтезированного белка сосредоточено в области межмембранного пространства, около 30% находится в содержимом матрикса этих органелл. Контроль чистоты полученных фракций осуществляли по анализу полипептидного состава образцов и по измерению в них активности маркерных ферментов. Кроме того, дополнительная идентификация актиноподобного белка была проведена непосредственно во фракциях матрикса и межмембранного пространства, митохондрий двумерным электрофорезом в полиакриламидном геле по методу О’Фаррела. Последующая окраска гелей серебром позволила выявить в них наличие двух основных изоформ немышечного актина (β- и γ-актинов). Данные по обнаружению актиноподобного белка во внутренних митохондриальных компартментах, обмен которого характеризуется высокой интенсивностью, могут свидетельствовать в пользу его истинно митохондриальной локализации.