БИОХИМИЯ, 1985, том 50, вып. 2, с. 325–336
УДК 577.152.1
Одноцепочечный низкомолекулярный кининоген плазмы крови кролика: выделение и характер фрагментации панкреатическим калликреином свиньи
Институт биологической и медицинской химии АМН СССР, Москва
Поступила в редакцию 02.07.1984
Аннотация
Из плазмы крови кролика, освобожденной от плазминогена, выделен высокоочищенный препарат низкомолекулярного кининогена (НМК). При получении препарата использовали хроматографию на колонке с ДЭАЭ-сефарозой CL-6B, гель-фильтрацию на ультрагеле AcA 34 и сефадексе G-100, а также градиентную хроматографию на колонке с гидроксилапатитом. Выход очищенного в 320 раз НМК составил 16%. Из 1 мг полученного препарата НМК трипсин освобождает 13—14 мкг-экв брадикинина (БК), или 0,85—0,95 моль кинина на 1 моль кининогена. НМК кролика состоит из одной полипептидной цепи, Mr 69000, а pI 4,63. Панкреатический калликреин свиньи выщепляет кинин из полипептидной цепи НМК, разрывая при этом две пептидные связи, что приводит к образованию S—S-связанной двуцепочечной молекулы. Последняя после восстановления S—S-связей дитиоэритритолом распадается на тяжелую (Mr 61000) и легкую (Mr 6800) цепи. Из продуктов бромцианового расщепления НМК выделен биологически активный пептид, который представляет собой Lys-БК. удлиненный с C-конца несколькими аминокислотными остатками. НМК кролика наиболее сходен с НМК человека по Mr, pI и расположению кининового фрагмента в молекуле белка.