БИОХИМИЯ, 1985, том 50, вып. 2, с. 270–278
УДК 577.152.341
Выделение и свойства фенилаланинаминопептидазы из Trichoderma koningii
Всесоюзный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов, Москва
Поступила в редакцию 31.05.1984
Аннотация
Из гриба Trichoderma koningii с помощью ионообменной хроматографии на QAE-сефадексе A-25, биоспецифической хроматографии на тетрапептидаминосилохроме и ель-фильтрации на сефадексе G-75 выделена фенилаланинаминопептидаза. Молекулярный вес гомогенного фермента, определенный при помощи электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии DS-Na и гель-фильтрацией через сефадекс G-75, равен 32000. Фермент состоит из одной полипептидной цепи и не обладает субъединичной структурой, его аминокислотный состав: Arg — 12, Lys — 10, His — 9, Asp — 28, Thr — 25, Ser — 29, Glu — 33, Pro — 13, Gly — 34, Ala — 32, Val — 18, Met —2, Ile — 14, Leu —21, Tyr —10, Phe — 11. Фенилаланинаминопептидаза имеет pH-оптимум при 9,4—9,7, предпочтительно отщепляет N-концевые ароматические аминокислоты, может отщеплять и остатки основных аминокислот, но совсем не гидролизует связи, образованные остатком пролина. Особенностью фенилаланинаминопептидазы T. koningii является ее сильная активация галогенидами щелочных металлов, достигающая максимума при 0,5—1 М концентрации солей. Фенилаланин-аминопептидаза, активность которой практически полностью ингибируется в присутствии ЭДТА, ЭГТА и 1,10-фенатролина, а также ионами Zn2+ и Cu2+, является металлоферментом. Наряду с фенилаланинаминопептидазой T. koningii образует и лейцинаминопептидазу.