БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 12, с. 1965–1971
УДК 577.158.54
Аллостерический механизм регуляции активности люциферазы светляков Luciola mingrelica
Кафедра химической энзимологии химического факультета Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 16.02.1984
Аннотация
Показано существование аллостерических центров для связывания ATP в люциферазе светляков анализом зависимости начальной скорости люциферазной реакции (v0) от концентрации ATP и на основании данных по влиянию на стабильность и активность фермента смешанных ангидридов мезитиленкарбоновой кислоты и AMP, ADP и ATP (АМР-MK, ADP-MK, ATP-MK). При низкой концентрации ATP отмечена S-образная зависимость v0 от концентрации ATP и активация фермента добавками малых количеств (1—100 нМ) ADP-MK. ATP-MK не влияет на стабильность люциферазы, малые концентрации АМР-MK стабилизируют фермент, а ADP-MK не только стабилизирует, но и вызывает конформационный переход в ферменте, вследствие чего активность люциферазы возрастает при инкубировании с ADP-MK. Предложена кинетическая модель аллостерического механизма регуляции активности люциферазы в условиях насыщающих концентрации люциферина и ионов магния. Согласно этой модели, люцифераза имеет два аллостерических и один субстратный центр для связывания ATP. Рассчитаны равновесные константы связывания ATP с аллостерическими и субстратным центрами. Сродство ATP к аллостерическим центрам в ~103 раз выше, чем к субстратному; связывание одной молекулы ATP с аллостерическим центром увеличивает сродство ATP к субстратному.