БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 11, с. 1899–1907
УДК 577.152.341
Выделение и свойства аминопептидазы из Bacillus thuringiensis
Всесоюзный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов, Москва
Поступила в редакцию 29.03.1984
Аннотация
Аминопептидаза с оптимумом действия при pH 10,0 выделена из культуральной жидкости B. thuringiensis var. finitimus последовательным применением гель-фильтрации на акрилексе Р-60, аффинной хроматографии на сефарозном сорбенте, содержащем в качестве лиганда ковалентно связанный пептидный ингибитор H-L-Thr (OBut)-L-Phe-L-Pro- и гель-фильтрации на сефадексе G-150. Фермент обладает широкой субстратной специфичностью, особенно легко отщепляет от аминного конца пептидов гидрофобные и ароматические аминокислоты, но не отщепляет дикарбоновые аминокислоты. Он наиболее стабилен при pH 7,5—10,3, ингибируется металлсвязывающими агентами и соединениями, блокирующими сульфгидрильные группы. Нативный фермент склонен к агрегации, обнаруживая при гель-фильтрации мол. вес от 480000 и выше. В денатурирующих условиях мол. вес фермента равен 27000 и 53000, что отвечает, по-видимому, мономеру и димеру аминопептидазы. Предполагается, что выделенная аминопептидаза является мембраносвязанным белком, склонным к агрегации, причем у подвида finitimus связь фермента с мембраной ослаблена, и он обнаруживается в культуральной среде.