БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 11, с. 1890–1898

УДК 577.152.3

Внеклеточная химотрипсиноподобная протеиназа Streptomyces spheroides шт. 35

© 1984 В.Г. Крейер, Г.Н. Руденская, Н.С. Ландау, А.В. Смирнов, Е.А. Тимохина, Н.С. Егоров, В.М. Степанов

Биологический и химический факультеты Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова

Поступила в редакцию 28.03.1984

Аннотация

Из фильтрата культуральной жидкости Str. spheroides шт. 35 выделена сериновая протеиназа G. Последовательное применение депигментирования на анионите ФЛФ, аффинной хроматографии на бациллихин-силохроме, бацитрацин-сефарозе и гель-хроматографии на сефадексе G-75 позволило выделить гомогенный фермент с выходом 60% и степенью очистки 1250 раз. Молекулярная масса фермента равна 19000±2000 Да; изоэлектрическая точка находится при pH 7,6—7,7; аминокислотный состав — Asp18, Thr21, Ser22, Glu10, Pro9, Gly30, Ala18, Cys4, Val13, Met1, Ile6, Leu10, Tyr5, Phe6, Trp0−1, Lys2, His3, Arg7. Протеиназа гидролизует эфиры ацилированных тирозина и аланина, n-нитроанилиды ацилированных пептидов с C-концевыми фенилаланином и лейцином, имеет pH-оптимум активности по Pyr-L-Phe-p-Na — 8,7. Фермент наиболее стабилен в интервале pH 5—8, сохраняет устойчивость в 6 М солянокислом гуанидине в присутствии ионов Ca2+, полностью инактивируется диизопропилфторфосфатом и бензилсульфонилфторидом — ингибиторами сериновых протсиназ. Выделенная из культуральной жидкости Str. spheroides шт. 35 протеиназа SSPG* принадлежит к семейству сериновых протсиназ химотрипсинового типа и особенно близка к протеиназам SGPA и SGPB Str. griseus.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Принятые сокращения: SSPG — протеиназа G Str. spheroides шт. 35, Z — бензилоксикарбонил, p-NA — n-нитроапилил, Pyr — пироглутамил, Bz — бензоил, DNP — 2,4-динитрофенил, АТЕЕ — этиловый эфир N-ацетил-D,L-тирозина, Ac(Ala3)OMe — метиловый эфир N-ацетил-L-аланил-L-аланил-L-аланина, ZAALNA — Z-L-Ala-L-Ala-L-Leu-p-NA, BAPNA — Bz-L-Arg-p-NA, DGGR — DNP-Gly-Gly-Arg, НРА — Hide Powder Azure, DFP — диизопропилфторфосфат, PMSF — бензилсульфонилфторид, n-ХМБ — n-хлормеркурибензоат, ЭДТА-Na2 — этилендиамиитетра­уксуснокислый натрий, ТРСК — тозил-L-фенилаланин-хлорметилкетон, TLCK — тозил-L-лизинхлорметилкстон, ДМФА — диметилформамид.