БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 11, с. 1762–1768
УДК 577.154.26
Исследование функциональных групп, существенных для каталитической активности β-1,3-глюканазы из Chlamys albidus, методом химической модификации
Тихоокеанский институт биоорганической химии ДВНЦ АН СССР, Владивосток
Поступила в редакцию 05.09.1983
Аннотация
Метод химической модификации применен для идентификации функционально важных аминокислотных остатков в молекуле β-1,3-глюканазы Л0 из кристаллического стебелька двустворчатого моллюска Chlamys albidus. Показано, что реагенты на сульфгидрильные группы (n-хлормеркурибензоат, иодацетамид и N-этилмалеинимид) практически не изменяют ферментативную активность. Не обнаружено ингибирующего действия тетранитрометана — реагента для нитрования тирозина. 2,4-Пентандионом модифицируется один остаток лизина без потери каталитических свойств β-1,3-глюканазы Л0. Особую роль карбоксильных групп в ферментативном катализе позволяет предполагать ингибирующее действие на β-1,3-глюканазу Л0 окиси пропилена и водорастворимого карбодиимида. Присоединение метилового эфира глицина к белковой молекуле в присутствии карбодиимида подтверждает направленность реакции по карбоксильной группе. β-1,3-Глюканаза теряет ферментативную активность при модификации остатков гистидина диэтилпирокарбонатом. Результаты исследований позволяют предполагать важную роль карбоксильных групп для активности β-1,3-глюканазы, хотя не может быть полностью исключено и участие остатка гистидина в катализе.