БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 10, с. 1650–1655
УДК 577.152:547.66
Изучение рН-зависимости кинетических параметров и ингибирования субстратом L-α-аминокапролактамгидролазы из клеток Cryptococcus laurentii
Лаборатория молекулярной биологии и биоорганической химии им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва
Поступила в редакцию 05.01.1984
Аннотация
Изучена pH-зависимость кинетических параметров ферментативного гидролиза L-α-аминокапролактама под действием L-α-аминокапролактамгидролазы из клеток Cryptococcus laurentii. Полученные данные хорошо описываются кинетической схемой, учитывающей существование двух форм субстрата — протонированной и непротонированной. В активном центре фермента предполагается наличие одной важной для катализа ионогенной группы, причем активными являются комплексы непротонированного субстрата как с протонированной, так и с непротонированной формами фермента. Показано, что ε-капролактам является конкурентным ингибитором L-α-аминокапролактамгидролазы. Определена константа конкурентного ингибирования, которая практически не зависит от pH. Установлено, что реакция ферментативного гидролиза L-α-аминокапролактама ингибируется субстратом; экспериментальные данные описываются схемой, предполагающей присоединение к фермент-субстратному комплексу дополнительно трех молекул субстрата с образованием неактивного комплекса.