БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 8, с. 1253–1262
УДК 577.152.1
Фотоокисление и модификация диэтилпирокарбонатом «биосинтетической» L-треониндегидратазы из пивных дрожжей Saccharomyces carlsbergensis
Научно-исследовательский институт по биологическим испытаниям химических соединений, Купавна Московской обл.
Поступила в редакцию 16.06.1983
Аннотация
Фотоокисление в присутствии метиленовой сини, а также модификация диэтилпирокарбонатом (ДЭПК) «биосинтетической» L-треониндегидратазы (КФ 4.2.1.16) из пивных дрожжей S. carlsbergensis приводили к зависимой от длительности воздействия инактивации фермента. На основании рассчитанных из зависимости констант инактивации от pH при разных температурах величин pK (7,30; 7,45 и 7,52 при 18, 25 и 32°) функциональной группы, выявляемой при фотоинактивации фермента, и величины ее теплоты ионизации (ΔH = 7,8 ккал/моль), а также способности субстрата (L-треонина) частично препятствовать снижению сродства фермента к субстрату при модификации фермента ДЭПК предполагается, что для связывания субстрата необходимы остатки гистидина в активном центре фермента. Исследование регуляторных свойств фермента, модифицированного ДЭПК в разных условиях, показало, что в нем могут модифицироваться аминокислотные остатки, участвующие в гомотропных кооперативных взаимодействиях между активными центрами (возможно, остатки гистидина) и в гетеротропных взаимодействиях между активными и «активаторными» и активными и «ингибиторными» аллостерическими центрами.