БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 7, с. 1203–1211
УДК 576.312.31
Выделение и состав ДНК связанного с ядерной оболочкой периферического слоя хроматина из лимфоцитов крови здорового и больного хроническим лимфолейкозом крупного рогатого скота
Лаборатория молекулярной биологии и биоорганической химии им. А.Н. Белозерского Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Всесоюзный научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко, Москва
Поступила в редакцию 19.12.1983
Аннотация
Из лимфоцитов крови здоровых и больных хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ) коров выделены ядра и фракция периферического слоя хроматина, связанного с ядерной оболочкой. Метод выделения этой фракции основан на обработке ядер ДНКазой I с последующей экстракцией фрагментированного хроматина солевыми растворами с низкой ионной силой и очисткой ядерных оболочек центрифугированием в градиентах концентрации сахарозы. Ядра лимфоцитов лейкозных животных отличаются от ядер лимфоцитов здоровых животных сильной конденсацией хроматина и пониженным содержанием РНК. Содержание ДНК во фракции периферического слоя хроматина в два раза больше при ХЛЛ по сравнению с нормой. ДНК периферического слоя хроматина здоровых и больных ХЛЛ коров по содержанию GC-пар оснований не отличается от тотальной ядерной ДНК (~45 мол. %). У больных ХЛЛ и здоровых животных содержание 5-метилцитозина в ДНК периферического слоя хроматина примерно на 20% меньше, чем в тотальной ядерной ДНК здоровых животных. При ХЛЛ в периферическом слое хроматина лимфоцитов крови коров уровень метилирования ДНК не изменяется. Поэтому известное уменьшение метилирования тотальной ядерной ДНК при ХЛЛ затрагивает только ДНК, не входящую в связанный с ядерной оболочкой периферический слой хроматина.