БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 7, с. 1089–1095
УДК 577.152.3
Исследование активности Na,K-ATPазы в эритроцитах млекопитающих
Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова АН СССР, Ленинград
Поступила в редакцию 24.06.1983
Аннотация
Изучено влияние мембранотропных веществ — неионного детергента твина-20 и ЭДТА на активность и некоторые свойства Na,K-ATPазы эритроцитов млекопитающих. Показано, что предварительная обработка цельных эритроцитов твином-20 позволяет выявить активность фермента, которая в интактных клетках не определяется. Установлено также, что тени эритроцитов с высокой и стабильной активностью Na,K-ATPазы можно получить при введении в гемолизирующую среду ЭДТА в 1—2 мМ концентрации. Несмотря на то, что для выявления активности фермента в цельных эритроцитах и их тенях применяли различные мембранотропные вещества, характер зависимости активности Na,K-ATPазы от концентрации MgCl2 и ЭДТА в инкубационной среде оказался сходным для обоих препаратов клеток; оптимальные концентрации MgCl2 и ЭДТА составили 3 и 1 мМ соответственно, а увеличение концентрации MgCl2 выше 3 мМ приводило к снижению ферментативной активности. На основании проведенного исследования предложены простые методы выявления активности Na,K-ATPазы в эритроцитах млекопитающих, с помощью которых определяется более высокая активность фермента, чем по литературным данным.