БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 7, с. 1080–1088
УДК 577.17
Кинетические закономерности Δ1-дегидрирования гидрокортизона и потребления кислорода свободными и адсорбированными клетками Arthrobacter globiformis 193
Институт биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, Пущино Московской области
Поступила в редакцию 24.05.1983
Аннотация
Изучены кинетические закономерности Δ1-дегидрирования гидрокортизона и сопряженного с этим процессом потребления кислорода свободными и адсорбированными на целлюлозе клетками Arthrobacter globiformis. Реакция дегидрирования гидрокортизона является сложным процессом, в котором наряду с 3-кетостероид-Δ1-дегидрогеназой принимает участие электронтранспортная цепь. Показано, что перенос реагентов через клеточную стенку и цитоплазматическую мембрану не лимитирует процесс трансформации гидрокортизона. Установлено, что скорость окисления гидрокортизона контролируется на стадии переноса электронов по дыхательной цепи. Скорость реакции дегидрирования гидрокортизона не зависит от концентрации кислорода в пределах 250—8 мкМ (Km для кислорода — 1,9 мкМ). Кинетика реакции окисления гидрокортизона описывается уравнением Михаэлиса—Ментен. Km для гидрокортизона составляет 90 мкМ, V — 165 нмоль · мин−1 мг−1 сухих клеток. Адсорбция клеток на целлюлозе не приводила к изменению кинетических параметров. Показано, что в условиях непрерывных трансформаций на колонках с вытеснением основным фактором, определяющим степень превращения гидрокортизона, является обеспеченность системы кислородом. Определены оптимальные условия для получения преднизолона в непрерывных условиях на колонке.