БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 4, с. 599–606

УДК 577.152.6

Очистка, четвертичная структура и некоторые свойства глутаминсинтетазы из корней тыквы

© 1984 Т.П. Голова, А.В. Пушкин, В.Л. Цупрун, З.Г. Евстигнеева, В.Л. Кретович

Институт биохимии им. А.Н. Баха АН СССР, Москва

Институт кристаллографии им. А.В. Шубникова АН СССР, Москва

Поступила в редакцию 07.07.1983

Аннотация

Разработан метод выделения и очистки глутаминсинтетазы из корней тыквы, позволяющий получить очищенный в 77 раз препарат с активностью 68 ед. на 1 мг белка и выходом 5,7%. Молекулярная масса фермента равна 460000, минимальная молекулярная масса — 53000. Методом электронной микроскопии установлено, что фермент состоит из 8 идентичных мономеров, расположенных с точечной группой симметрии 422 (D4) в двух слоях по вершинам двух квадратов, повернутых вокруг общей оси 4-го порядка на угол 40°. Оптимум pH в присутствии Mg2+ и Mn2+ соответственно равен 7,2 и 4,8. Энергия активации фермента с Mg2+ и Mn2+ соответственно равна 4,1 и 1,9 ккал на 1 моль мономера (53000). Соотношение активностей с Mg2+ и Mn2+ равно 3 : 2. Величины Km(каж) для глутамата, аммония и ATP в присутствии Mg2+, а также для Mg-ATP и Mg2+ соответственно равны 6,2, 0,36, 0,4, 4,2 и 8,3 мМ; оптимальное соотношение [Mg2+] и [ATP] равно (2—5) : 1. Глутаминсинтетаза корней тыквы отличается от глутаминсинтетазы цитозоля и глутаминсинтетазы хлоропластов листьев тыквы по ряду параметров и представляет собой молекулярную форму этого фермента, специфичную для корней.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha