БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 4, с. 531–539
УДК 577.152.344.1
Внеклеточная кислая сериновая протеиназа D Streptomyces rutgersensis
Химический факультет Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Всесоюзный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов, Москва
Поступила в редакцию 29.07.1983
Аннотация
Аффинной хроматографией на бацитрацин-сефарозе в присутствии Na2-ЭДТА* выделена внеклеточная сериновая протеиназа Streptomyces rutgersensis — протеиназа D. Протеолитическая активность фермента полностью подавляется специфическими ингибиторами сериновых протеиназ: фенилметилсульфонилфторидом и диизопропилфторфосфатом. Молекулярная масса равна 28000±2000. Протеиназа существует в виде двух изоформ, имеющих pI 4,1 и 4,3. По аминокислотному составу: Asp34The26Ser25Glu14Pro14Gly41Ala47Val26Met2–3Ile10Leu11Tyr7Phe3Trp5Lys7His5Arg7, для которого характерно отсутствие остатков полуцистина и низкое содержание ароматических аминокислот, протеиназа D. S. rutgersensis наиболее близка к протеиназам D и E S. griseus. N-Концевая последовательность аминокислот: AlaThr(Val)GlnThr(Val)AsnProProSerTrpGlyLeuAspXaaIleAspGlnAlaXaaXaaProLeuGluGly необычна и проявляет некоторое сходство с последовательностью субтилизина Карлсберг. Протеиназа отличается неустойчивостью и ярко выраженной зависимостью активности и стабильности от присутствия ионов некоторых металлов, особенно натрия. В присутствии 0,2 М NaCl фермент наиболее устойчив при pH 7—10; протеолитическая активность максимальна в интервале pH 8—10.
Текст статьи
Сноски
* Принятые сокращения: Na2-ЭДТА — динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты; Z — бензилоксикарбонил; pNA — n-нитроанилид;