БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 3, с. 519–526
УДК 577.155.3.072:576.852.1.098
Выделение и очистка двух внеклеточных ацилаз из актиномицета рода Streptoverticillium
Лаборатория молекулярной биологии и биоорганической химии им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва
Всесоюзный научно-исследовательский институт антибиотиков, Москва
Поступила в редакцию 29.07.1983
Аннотация
Культуральная жидкость актиномицета рода Streptoverticillium содержит две ацилазы, близкие по физико-химическим свойствам, но заметно отличающиеся по термостабильности и субстратной специфичности. Более термостабильной является аминоацилаза. В результате очистки получены гомогенные препараты обеих ацилаз с выходом 15%. Процедура очистки включала высаливание сульфатом аммония, гель-фильтрацию на сефадексе и ионообменную хроматографию на катионите (КМ-целлюлоза) и анионите (ДЭАЭ-тойоперл). Оба фермента являются гликопротеидами. Содержание углеводов составляет 5% по массе для пенициллинацилазы и 11% для аминоацилазы. Физико-химические характеристики обеих ацилаз близки: близкие коэффициенты седиментации молекулярная масса и электрофоретическая подвижность, изоэлектрическая точка в щелочной области pH, близкий аминокислотный состав. Пенициллинацилаза специфически гидролизует феноксиметилпенициллин (пенициллин-V), аминоацилаза эффективно гидролизует N-ацетильные производные L-аминокислот. Обе ацилазы не являются металлоферментами.