БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 2, с. 334–343
УДК 577.152.1
Глутаматдегидрогеназы одноклеточной зеленой водоросли Ankistrodesmus braunii. Кинетические свойства
Институт биохимии им. A.H. Баха АН СССР, Москва
Поступила в редакцию 02.06.1983
Аннотация
Изучено и детально проанализировано кинетическое поведение NAD(P)-глутаматдегидрогеназы и NADP-глутаматдегидрогеназы, выделенных из клеток A. braunii. В реакции окислительного дезаминирования кинетическое поведение обеих глутаматдегидрогеназ подчиняется уравнению Михаэлиса — Ментен. Напротив, в кинетическом поведении ферментов при катализе реакции восстановительного аминирования обнаружены существенные отклонения от уравнения Михаэлиса — Ментен. Так, насыщение неспецифичной к кофактору глутаматдегидрогеназы NAD(P)H описывается сложной кривой с несколькими промежуточными плато, что объясняется сменой отрицательной кинетической кооперативиости на положительную. При насыщении NADP-специфичной глутаматдегидрогеназы 2-оксоглутаратом при оптимальных концентрациях NADPH и ионов аммония обнаружена положительная кинетическая кооперативность, характеризуемая коэффициентом Хилла (h), равным 2. Насыщение обеих глутаматдегидрогеназ аммонием при оптимальных концентрациях других субстратов характеризовалось наличием в области низких концентраций отрицательной кинетической кооперативиости, которая в случае NAD(P)- глутаматдегидрогеназы сменялась положительной кооператнвностью в области высоких концентраций. Такие кривые насыщения в координатах 1/v0 от 1/[S]0 представляют собой обычно ярко выраженную бифазную кривую, дающую возможность определить два значения Km(каж). Анализ литературных данных показывает, что подобный характер насыщения аммонием присущ многим глутаматдегидрогеназам.