БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 2, с. 292–301
УДК 577.156
Карбоксипептидаза T — внеклеточная карбоксипептидаза термоактиномицетов — отдаленный аналог карбоксипептидаз животных
Всесоюзный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов, Москва
Химический факультет Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Институт кардиологии АМН СССР, Москва
Институт микробиологии АН СССР, Москва
Поступила в редакцию 24.05.1983
Аннотация
Карбоксипептидаза T — внеклеточная карбоксипептидаза Thermoactinomyces sp. — выделена и очищена аффинной хроматографией на бацитрацинсодержащих сорбентах. Гомогенность белка подтверждена электрофорезом в DS-Na (Mr 38000) и изоэлектрофокусированием в ПААГ (изоэлектрическая точка 5,3). Карбоксипептидаза T проявляет смешанную специфичность по сравнению с панкреатическими карбоксипептидазами A и В и с приблизительно одинаковой эффективностью расщепляет пептидные связи, образуемые C-концевыми остатками основных и нейтральных гидрофобных аминокислот. Фермент нечувствителен к ингибиторам сериновых и тиоловых протеиназ, но полностью ингибируется ЭДТА и о-фенантролином. Карбоксипептидаза T обладает максимальной активностью при pH 7—8. При повышении температуры от 20° до 70° активность возрастает ~ в 10 раз. В присутствии 1 мМ Ca2+ фермент проявляет повышенную термостабильность. Карбоксипептидаза T по ряду свойств, в том числе по субстратной специфичности, близка к металлокарбоксипептидазе, секретируемой Streptomyces griseus. N-концевая аминокислотная последовательность карбоксипептидазы T: Asp-Phe-Pro-Ser-Tyr-Asp-Ser-Gly-Tyr-His-Asn-Tyr-Asn-Glu-Met-Val-Asn-Lys-Ile-Asn-Thr-Val-Ala-Ser-Asn-Tyr-Pro-Asn-Ile-Val-Lys-Thr-Phe-Ser-Ile-Gly-Lys-Val-Tyr-Glu-Gly-Xaa-Gly-Leu- обнаруживает 21 % совпадений с соответствующими участками панкреатических карбоксипептидаз A и B. Таким образом, есть все основания полагать, что эти ферменты происходят от общего эволюционного предшественника.