БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 2, с. 261–271
УДК 577.15.154
Сравнительное изучение сиалилтрансфераз в культурах клеток эмбрионов крыс, трансформированных ДНК бычьего аденовируса типа 3
Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина АН СССР, Москва
Институт молекулярной биологии АН СССР, Москва
Поступила в редакцию 03.05.1983
Аннотация
Проводили сравнительное изучение удельной активности мембраносвязанных сиалилтрансфераз из шести культур клеток, трансформированных ДНК бычьего аденовируса типа 3 (БА-3), до и после пассажа через организм животного. Показано увеличение сиалилтрансферазной активности по отношению к высокомолекулярному акцептору асиалофетуину для большинства трансформированных и опухолевых линий. Идентификация продуктов сиалирования методом бумажной хроматографии выявила во всех исследованных культурах клеток сиалилтрансферазу, синтезирующую нейраминозил-α(2→6)N-ацетиллактозамин. Исследованы зависимости активности мембраносвязанных ферментов от pH среды и показано возникновение дополнительного оптимума pH эндогенной активности в клетках большинства трансформированных линий (оптимум pH 5,5—6,0). Методом изоэлектрофокусирования детергентных экстрактов в градиенте плотности сахарозы показано присутствие множественных форм фермента во всех исследованных линиях. Для наиболее опухолеродных линий клеток Оп2а/4 и ОАВ2а показана активация форм, обладающих высокой экзогенной активностью, в области градиента pH 6,0—6,5. Исследованы множественные формы линии Оп2а/4 в области pH 5,8—6,3 и 7,6—8,0; показано, что разные по pI формы имеют разные оптимумы pH. Корреляция между изменением активности сиалилтрансфераз и возрастанием онкогенности трансформированных клеток после пассажа через организм хозяина обнаружена только у одной группы трансформированных клеток.