Лютеинизирующий гормон кашалота. Выделение, разделение на субъединицы и изучение аминокислотной последовательности α-субъединицы

Аннотация

Выделенный из гипофиза китов лютеинизирующий гормон * разделяли па α- и β-субъединицы с использованием ионообменной хроматографии на сульфоэтнл-сефадексе. Субъединицы гормона восстанавливали, карбоксиметилировали, расщепляли BrCN и протеолитическими ферментами. С целью блокады трипсинового гидролиза по остаткам лизина α-субъединицу подвергали малеилированию. Крупные бромциановые фрагменты расщепляли химотрипсином и трипсином, а крупные трипсиновые фрагменты — химотрипсином. Полученные пептиды разделяли гель-фильтрацией через сефадексы, ионообменной хроматографией на аминексе A-5 и распределительной хроматографией в тонком слое целлюлозы. Последовательность аминокислот в пептидах определяли методом Эдмана с идентификацией N-концевых аминокислот реакцией с дансилхлоридом, а также методом Эдмана с использованием диметиламиноазобензол-4-изотиоцианата. Показано, что α-субъедипнца лютеинизирующего гормона представляет собой пептидную цепь, состоящую из 96 аминокислотных остатков с присоединенными ковалентно углеводными цепочками по остаткам аспарагина в положениях 56 и 82. На N-конце α-субъединицы идентифицирован фенилаланин, а на C-конце — серин. В выделенной α-субъединице обнаружена гетерогенность по N-копцевому остатку: помимо фенилаланина на ее N-копце определены также треонин и в следовых количествах пролин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота и глицин.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: