БИОХИМИЯ, 1984, том 49, вып. 1, с. 51–59
УДК 577.352.4
Применение З,З'-дипропилтиокарбоцианин йодида diS-C3-(5) для изучения конформационных перестроек и обнаружения Ca-связывающих белков
Четвертое Главное управление при МЗ СССР, Москва
Поступила в редакцию 10.03.1983
Аннотация
Показано, что З.З′-дипропилтиокарбоцианин йодид diS-C3-(5) может быть использован как флуоресцентный зонд для регистрации конформационных перестроек кальмодулина и тропонина C, а также для определения содержания этих Ca-связывагощих белков в тестируемых образцах. Чувствительность метода (10-7 M) всего лишь в пять раз ниже, чем при определении содержания кальмодулина с помощью фосфодиэстеразы, и на 1—2 порядка выше чувствительности других методов, основанных на регистрации конформационных превращений белка. Спектральные характеристики зонда позволяют проводить измерения в мутных средах и в присутствии большинства других оптически активных соединений. Приведены данные, демонстрирующие перспективность данного подхода для исследования конформационных перестроек кальмодулина при воздействии кальция, магния, одновалентных катионов и белков-исполнителей (тропонина I, фосфодиэстеразы). На примере фосфодиэстеразы и Ca-ATPазы показано также, что при определенных условиях diS-C3-(5), как и другие амфипатические соединения, способен модифицировать активность кальмодулинзависимых ферментов.