БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 11, с. 1810–1819

УДК 577.152.321

Растворимая и мембраносвязанная нейтральная α-глюкозидаза почек человека

© 1983 И.С. Лукомская, Н.А. Ушакова, Е.В. Казлас

Аннотация

Показано, что растворимая форма α-глкжозидазы 1 коркового слоя почек человека не образуется из мембраносвязанной формы этого фермента щеточной каймы. Нейтральная мембраносвязанная и растворимая α-глюкозидазы 1 почек человека получены в высокоочищенном и гомогенном состоянии соответственно. Растворимый фермент, как и мембраносвязанный, представляет собой гликопротеин. Оба фермента имеют одинаковые оптимумы pH, термостабильность, практически не отличаются по электрофоретической подвижности в полиакриламидном геле в присутствии DS-Na после удаления гидрофобного «якоря» от мембраносвязанного фермента (Mr 280000 и 275000 соответственно). Они обладали одинаковыми величинами Km по отношению к мальтозе (0,7 мМ) и 4-метилумбеллиферил-α-D-глюкопиранозиду (0,57 мМ). В то же время мембраносвязанный и растворимый фермент отличались по величине молекулярной массы, определенной методом гель-фильтрации через сефарозу 6B или ультрагель AcA 34. Для мембраносвязанной α-глюкозидазы 1 и 2 величина относительной молекулярной массы, определенная методом гель-фильтрации через сефарозу 6B, составила 520000 и 440000, а для растворимой α-глюкозидазы 1 и 2 470000 и 360000 соответственно. Величины pI, определенные методом изоэлектрофокусирования, были равны для мембраносвязанной α-глюкозидазы 1 4,10±0,02 и для растворимого фермента 4,40±0,03. Мембраносвязанная нейтральная α-глюкозидаза 1 является сиалированным ферментом, а растворимый фермент либо совсем не содержит остатков нейраминовой кислоты, либо содержит их в крайне незначительных количествах. Сделан вывод, что растворимая и мембраносвязанная нейтральная α-глюкозидазы почек человека являются близкими формами фермента, отличающимися по степени сиалирования и наличием гидрофобного «якоря» у мембраносвязанной формы фермента. Синтез обеих форм фермента кодируется, вероятно, общим структурным геном.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Работа доложена на VII Всесоюзной конференции по химии и биохимии углеводов, Пущино, сентябрь 1982 г.