БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 10, с. 1661–1666
УДК 577.152.321
Исследование эндо-β-1,3-глюканазы методом аффинного ингибирования
Аннотация
Синтезированы 2´,3´-эпоксипропил-1-тио-β-D-глюкопиранозид, который избирательно модифицировал каталитически важную нуклеофильную группу активного центра β-1,3-глюканазы из морского моллюска S. sachalinensis (ЛIV), вызывая инактивацию на 95%. Методом разностной УФ-спектрофотометрии проведено сравнительное изучение нативной и ингибированной эпоксипропилтиоглюкопиранозидом глюканазы ЛIV. Получены разностные УФ-спектры поглощения ингибированного фермента с субстратами — ламинарином и ламинариолигосахаридами со средней степенью полимеризации 3, обусловленные участием остатков триптофана в образовании тройного фермент-ингибитор-субстратного комплекса, тогда как с глюконо-1,5-лактоном подобных спектров не возникало. Показано, что эпоксипропилтиоглюкопиранозид защищает доступный остаток триптофана глюканазы ЛIV от окисления N-бромсукцинимидом.