БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 10, с. 1596–1603
УДК 541.64:547.965
Гетерогенный характер модификации белков при замещении их аминогрупп. ацилирование α-химотрипсина
Аннотация
Проведено ступенчатое ацилирование химотрипсина хлорангидридом акриловой кислоты и малеиновым ангидридом. Методом изоэлектрофокусирования в тонком слое показана гетерогенность получаемых образцов, связанная со статистическим характером ацилирования аминогрупп фермента. Наиболее гетерогенны препараты с замещением ~50% аминогрупп. Диск-электрофорез при этом не дает представления о степени гетерогенности и не может служить методом ее контроля. Все полученные образцы активны по низкомолекулярному и белковым субстратам; изменение активности по гидролизу белковых субстратов зависит от природы модификатора и может быть связано с электростатическим взаимодействием между макромолекулами модифицированного фермента и субстрата. Наблюдаемое снижение активности по гидролизу низкомолекулярного субстрата обусловлено увеличением Km без изменения каталитической константы.